一种基于荧光素酶的HIV药物筛选细胞模型
目的：构建基于荧光素酶的单次感染HIV药物筛选细胞模型用于抗HIV药物筛选。 方法:构建含荧光素酶报告基因luc的假型慢病毒质粒，将VSV—G外膜糖蛋白的表达质粒，HIV-1 Rev蛋白表达质粒，HIV Gag—pol蛋白表达质粒和含荧光素酶报告基因的重组慢病毒质粒共转染293FT细胞，制备假型慢病毒。在假型慢病毒生产和再感染新鲜293FT细胞的过程中加入逆转录酶和蛋白酶抑制剂(如AZT，Zidovudine)，检测再感染新鲜293FT细胞中荧光素酶的表达水平，从而判断药物对HIV的抑制作用，进行模型的建立及条件的优化。 结果：成功地构建了含荧光素酶报告基因的重组慢病毒质粒pLenti—Luc。利用已知的抗HIV药物进行测试，发现HIV药物处理组细胞中荧光素酶活性低于对照组。 结论：成功地建立了基于荧光素酶的HIV药物筛选细胞模型，该系统使用单次感染的报告病毒，具有良好的安全性，而荧光素酶报告基因使该系统具备极高的敏感性。
荧光素酶基因 假型慢病毒 HIV感染 药物筛选 细胞模型
张昕 张宝中 安小平 刘大斌 王盛 李敬云 周育森 童贻刚
军事医学科学院微生物流行病研究所,病原微生物生物安全国家重点实验室,北京,100071
国内会议
景德镇
中文
353-358
2009-08-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）