改良系列酶消化法在人椎间盘髓核细胞培养中的应用
目的:通过Ⅰ型和Ⅱ型胶原酶在不同浓度下消化能力的比较,探讨适合于髓核细胞分离培养的消化酶和浓度. 方法:椎间盘髓核组织剪碎,分成2大组:分别用胰蛋白酶+胶原酶Ⅰ型(A组)、胰蛋白酶+胶原酶Ⅱ型(B组)消化,各大组根据不同浓度分别为0.2%,0.1%和0.02%,在消化2,4,8,24,48,72h时在倒置显微镜下计算髓核细胞数,台盼蓝染色检查其活力. 结果:各组在相同时间点、相同浓度下比较,Ⅱ组细胞数多于Ⅰ组,48h后3组细胞数无明显差异,0.02%Ⅱ型胶原酶消化组细胞活力较其他两组高. 结论:极低浓度Ⅱ型胶原酶消化法不仅可以节省酶量,而且对髓核细胞的损伤小,适于髓核细胞消化培养.
酶消化法 髓核细胞 胶原酶 椎间盘
冯旭 陈安民 孙正义 黄建明 刘莉
复旦大学附属华山医院南汇分院骨科 201300 华中科技大学同济医学院附属同济医院矫形外科 兰州大学附属第二医院骨科研究所,兰州
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2009-09-21(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)