人精子蛋白17放射诱导表达细胞模型的构建
目的：构建pEgr-Sp17重组质粒并检测其在人卵巢癌细胞系HO8910中的辐射诱导表达,探索Egr-1基因调控序列辐射诱导下游基因表达的功能,建立放射诱导表达Sp17的细胞模型。 方法：用双酶切、粘端连接的方法构建含有辐射诱导特性的早期反应因子Egr-1和人Sp17基因的pEgr-Sp17重组质粒,利用脂质体介导转染人HO8910细胞,用免疫细胞化学方法检测X射线照射后被转染细胞中Sp17的表达。在确证Sp17能瞬时表达后,继续用含G 418 500μg/mL的RPMI 1640培养细胞,筛选稳定表达Sp17的细胞株. 结果：测序结果和酶切鉴定均证实pEgr-Sp17重组质粒构建完全正确.免疫细胞化学发现pEgr-Sp17重组质粒转染的人HO8910细胞表达Sp17蛋白。 结论：X射线可诱导pEgr-Sp17重组质粒在人HO8910细胞表达Sp17蛋白,成功构建Sp17蛋白放射诱导表达的卵巢癌细胞模型。
卵巢癌 细胞模型 精子蛋白17 辐射诱导 基因调控 基因表达 免疫细胞化学
张春华 李芳秋 杨爱龙 缪家文 朱锡旭
南京军区南京总医院,全军医学检验中心,江苏南京,210002 南京军区南京总医院,放射治疗科,江苏南京,210002
国内会议
南宁
中文
81-84
2007-09-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）