巴西固氮螺菌中glnB和glnZ基因在固氮调节中的不同作用
在巴西固氮螺菌(Azospirllum brasilense)中,glnB和glnZ是两个高度同源基因,分别位于3.7kb/EcoR Ⅰ+PstⅠ和3.7kb/SalⅠ的两个不同染色体片段上.用卡那霉素盒(Km<”r>-cassette)插入法,对glnB和glnZ分别进行定位诱变,并获得相应的突变株,即glnB<”->和glnZ<”->.研究表明,glnB<”->突变株丧失固氮酶活性,表现为Nif<”->,而glnZ<”->象野生型菌株一样具有固氮酶活性.为了进一步研究这两个基因的功能,将glnB和glnZ分别构建在PKV100载体上形成重组质粒pVK-Ⅱ和pVK-Z,对glnB<”->和glnZ<”->突变株进行互补实验,进一步证明了glnB与固氮酶活有直接相关性,而glnZ无此作用.同时,通过三亲接合法将pVK-Ⅱ和pVK-Z分别转移到巴西固氮螺菌野生型Yu62和具有一定抗铵能力的draT<”->突变株中,使glnB和glnZ的拷贝数增加,进一步比较它们的固氮酶活性.结果表明多拷贝的glnB基因,能显著提高固氮酶活性,而多拷贝glnZ对固氮酶活性无影响.同时,将pVK-Ⅱ和pVK-Z分别转移到nifA<”->突变株中,结果表明glnB和glnZ均不能恢复nifA<”->的固氮酶活性.
巴西固氮螺菌 固氮微生物 突变株 固氮酶活性 基因蛋白质
陈三凤 管乐 应娇妍 李周华 李季伦 陈三凤 王娟 李季伦
中国农业大学生物学院 中国农业大学国家农业生物技术国家重点实验室
国内会议
北京
中文
105-108
2001-09-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）