蛋白质折叠与分离耦合技术研究
以溶菌酶为模拟体系,对体积排阻色谱法进行蛋白质折叠与分离耦合过程进行实验研究,圆二色性光谱法分析结果证实了复性溶菌酶与天然溶菌酶的结构一致性;复性溶菌酶与天然溶菌酶色谱保留体积的差异揭示出折叠过程中无活性蛋白质聚集体的存在及其向复性蛋白质转化的机制;不同初始浓度的复性实验证实了蛋白质聚集体的存在及其与变性蛋白质初始浓度的关系;采用短色谱柱的折叠分离实验结果表明蛋白质折叠是一个快速过程;不同尿素浓度下的折叠分离实验结果表明尿素具有Chaprone-like的功能,并可有效抑制复性过程中蛋白质聚集体的生成;与稀释复性法的对比实验表明:体积排阻色谱法具有稀释倍数小、复性产品活性收率高、复性蛋白浓度高等优点,适宜于大规模基因工程蛋白质产品的折叠分离.
体积排阻色谱 溶菌酶 圆二色谱 蛋白质折叠 分离耦合技术
卢滇楠 刘铮
清华大学化学工程系(北京)
国内会议
天津
中文
482-486
2000-10-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）